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濃縮膠的作用原理 濃縮膠和分離膠的作用分別是什么

瀏覽 1077次發(fā)布時(shí)間:2024-05-02?

濃縮膠和分離膠的作用分別是什么

濃縮膠的作用:濃縮膠有堆積作用。帶電荷的蛋白質(zhì)或核酸離子在大孔徑膠中移動(dòng)時(shí)阻力小,移動(dòng)速度快,當(dāng)接近小孔徑的分離膠時(shí),遇到的阻力大,移動(dòng)速度減慢而使樣品濃縮,形成一條狹窄區(qū)帶,以減少電泳過(guò)程中的譜帶擴(kuò)散。分離膠的作用:蛋白質(zhì)或核酸在電泳過(guò)程中由濃縮膠進(jìn)入分離膠,由于分子篩作用,小分子的物質(zhì)容易通過(guò),阻力小,遷移速度快;大分子的則受到較大的阻力而被滯后。

1、濃縮膠的作用:濃縮膠有堆積作用。帶電荷的蛋白質(zhì)或核酸離子在大孔徑膠中移動(dòng)時(shí)阻力小,移動(dòng)速度快,當(dāng)接近小孔徑的分離膠時(shí),遇到的阻力大,移動(dòng)速度減慢而使樣品濃縮,形成一條狹窄區(qū)帶,以減少電泳過(guò)程中的譜帶擴(kuò)散。

2、分離膠的作用:蛋白質(zhì)或核酸在電泳過(guò)程中由濃縮膠進(jìn)入分離膠,由于分子篩作用,小分子的物質(zhì)容易通過(guò),阻力小,遷移速度快;大分子的則受到較大的阻力而被滯后。

為什么濃縮膠具有濃縮作用啊?實(shí)驗(yàn)的思考題~~~求大神解答!!!

濃縮膠的作用是有堆積作用,凝膠濃度較小,孔徑較大,把較稀的樣品加在濃縮膠上,經(jīng)過(guò)大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個(gè)狹窄的區(qū)帶。當(dāng)樣品液和濃縮膠選pH6.8的TRIS/HCL緩沖液,電極液選TRIS/甘氨酸。電泳開(kāi)始后,HCL解離成氯離子,甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷,因此一起向正極移動(dòng),其中氯離子最快,甘氨酸根離子最慢,蛋白居中。電泳開(kāi)始時(shí)氯離子泳動(dòng)率最大,超過(guò)蛋白,因此在后面形成低電導(dǎo)區(qū),而電場(chǎng)強(qiáng)度與低電導(dǎo)區(qū)成反比,因而產(chǎn)生較高的電場(chǎng)強(qiáng)度,使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動(dòng),形成以穩(wěn)定的界面,使蛋白聚集在移動(dòng)界面附近,濃縮成一中間層。大大提高了電泳的靈敏度。
參考答案:http://baike.baidu.com/view/3335221.htm

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法中濃縮膠的作用是什么?

在上樣孔里加樣的時(shí)候樣品是有一定的高度的,樣品里的蛋白沒(méi)有站在一條起跑線(xiàn)上。濃縮膠的作用就是壓縮樣品中的蛋白質(zhì)成為一條細(xì)線(xiàn)站在同一條起跑線(xiàn)上,這樣影響蛋白遷移速率的因素就只有分子量的大小了,也就更有可比性了。

濃縮膠的作用原理?

濃縮膠是在不連續(xù)聚丙烯 酰胺凝膠電泳中,同一介質(zhì)的凝膠濃度分為 兩種,負(fù)極的加樣側(cè)一般濃度為2%?5%, 稱(chēng)為濃縮膠,其余部分濃度為6%?8%, 稱(chēng)為分離膠。

由于濃縮膠濃度低、孔徑大, 而分離膠濃度高、孔徑小。

帶電荷的蛋白質(zhì) 或核酸離子在大孔徑膠中移動(dòng)時(shí)阻力小,移動(dòng)速度快,當(dāng)接近小孔徑的分離膠時(shí),遇到的阻力大,移動(dòng)速度減慢而使樣品濃縮,形 成一條狹窄區(qū)帶,以減少電泳過(guò)程中的譜 帶擴(kuò)散。

濃縮膠與分離膠的pH值不同也呵 以強(qiáng)化樣品的濃縮作用。

濃縮膠的作用是有堆積作用,凝膠濃度較小,孔徑較大,把較稀的樣品加在濃縮膠上,經(jīng)過(guò)大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個(gè)狹窄的區(qū)帶。

當(dāng)樣品液和濃縮膠選pH6.8的TRIS/HCL緩沖液,電極液選TRIS/甘氨酸。

電泳開(kāi)始后,HCL解離成氯離子,甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。

蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷,因此一起向正極移動(dòng),其中氯離子最快,甘氨酸根離子最慢,蛋白居中。

電泳開(kāi)始時(shí)氯離子泳動(dòng)率最大,超過(guò)蛋白,因此在后面形成低電導(dǎo)區(qū),而電場(chǎng)強(qiáng)度與低電導(dǎo)區(qū)成反比,因而產(chǎn)生較高的電場(chǎng)強(qiáng)度,使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動(dòng),形成以穩(wěn)定的界面,使蛋白聚集在移動(dòng)界面附近,濃縮成一中間層。

大大提高了電泳的靈敏度。

濃縮膠的作用原理?

濃縮膠的作用是有堆積作用,凝膠濃度較小,孔徑較大,把較稀的樣品加在濃縮膠上,經(jīng)過(guò)大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個(gè)狹窄的區(qū)帶。當(dāng)樣品液和濃縮膠選pH6.8的TRIS/HCL緩沖液,電極液選TRIS/甘氨酸。電泳開(kāi)始后,HCL解離成氯離子,甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷,因此一起向正極移動(dòng),其中氯離子最快,甘氨酸根離子最慢,蛋白居中。電泳開(kāi)始時(shí)氯離子泳動(dòng)率最大,超過(guò)蛋白,因此在后面形成低電導(dǎo)區(qū),而電場(chǎng)強(qiáng)度與低電導(dǎo)區(qū)成反比,因而產(chǎn)生較高的電場(chǎng)強(qiáng)度,使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動(dòng),形成以穩(wěn)定的界面,使蛋白聚集在移動(dòng)界面附近,濃縮成一中間層。大大提高了電泳的靈敏度。

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